近日，中國農(nóng)業(yè)科學院北京畜牧獸醫(yī)研究所寵物疫病防控科技創(chuàng)新團隊利用反向遺傳技術(shù)，在國際上*成功構(gòu)建了貓細小病毒和豬細小病毒的感染性克隆，建立了一種快速構(gòu)建豬細小病毒全長感染性克隆的方法。該研究為今后細小病毒疫苗的研發(fā)提供了良好的載體平臺，也為其它細小病毒成員全基因組的構(gòu)建提供了思路，開拓了一條新途徑。相關(guān)研究成果在線發(fā)表在《病毒學文獻（Archives of Virology》上。

　　近年來，豬細小病毒感染呈擴大上升趨勢，給全球養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟損失。豬細小病毒是引起豬繁殖障礙的主要病原之一，感染的主要對象是孕豬，特別是懷孕前的初產(chǎn)母豬，能夠引起懷孕母豬流產(chǎn)、產(chǎn)死胎、胎兒木乃伊化等，而母體通常缺乏臨診癥狀。

　　該團隊首先利用人工基因合成的方法將豬細小病毒（BQ分離株）構(gòu)建到改造后的pBlueScript II SK載體上，再利用PCR擴增豬細小病毒基因組的中間編碼區(qū)序列，并進行同義突變，形成限制性內(nèi)切酶切位點，*后通過無縫克隆技術(shù)，構(gòu)建成豬細小病毒質(zhì)粒，利用特異性引物和限制性內(nèi)切酶對篩選的克隆質(zhì)粒進行分析和驗證，將驗證正確的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染進PK-15細胞中，進行感染性克隆病毒的拯救，*終成功拯救出包含豬細小病毒全基因組（攜帶遺傳標記限制性內(nèi)切酶）的感染性克隆病毒。

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